最新：细胞培养为何要先裂解红细胞

三十而立年

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红细胞裂解液是一种简便易行的去除红细胞的方法，其原理是通过裂解液裂解红细胞，且该过程既不会损伤有核细胞，又能充分去除红细胞。这种裂解方式较为温和，主要应用于经酶消化分散的组织细胞分离纯化、淋巴细胞分离纯化，以及组织细胞蛋白与核酸提取等验中红细胞的去除。经红细胞裂解液处理后得到的组织细胞不含红细胞，可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和提取等验操作。

二、使用说明
①组织细胞样品
1）新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液后，离心并弃去上清液。
2）从4℃冰箱中取出ELS裂解液，按照1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液（即1ml细胞压积加入3-5ml裂解液），轻轻吹打使其混匀。
3）以800-1000rpm的转速离心5-8分钟，之后离心弃去上层红色清液。
3）收集沉淀部分，加入Hank’s液或血清培养液离心洗涤2-3次。
4）若裂解不完全，可重复步骤2和步骤3。
5）重悬细胞，用于后续验；若需提取RNA，比较好从步骤4开始在DEPC水配制的溶液中进行操作。
红细胞具有独特的特点和价值：它的生命周期很短，一般只有120天，但繁殖速度极，能很好地体现细胞的分裂过程，是所有细胞中分裂比较的，因此在细胞培养中非常有用。此外，红细胞的构造十分简单，没有任何细胞器，仅由细胞膜和蛋白质构成。